Warenwetregeling Methode van onderzoek voedingsvezelgehalte

Het gehalte aan voedingsvezel van de in het Warenwetbesluit Voedingswaarde-informatie levensmiddelenbedoelde eet- of drinkwaren, wordt bepaald volgens de methode van onderzoek die is opgenomen in de bij deze regeling behorende bijlage.

Deze regeling treedt in werking met ingang van 1 oktober 1993.

Deze regeling wordt aangehaald als:
Warenwetregeling Methode van onderzoek voedingsvezelgehalte.
Deze regeling zal in de Staatscourant worden geplaatst.

4.1.1. Ethanol 95% v/ v, C 2H 5OH
4.1.2. Aceton, C 2H 6O
4.1.3. Dinatriumwaterstoffosfaat watervrij, Na 2HPO 4
4.1.4. Natriumdiwaterstoffosfaat monohydraat, NaH 2PO 4.H 2O
4.1.5. Termamyloplossing 120L (120KNU/g)
4.1.6. Protease uit Bacillus Subtilis gelyofiliseerd
4.1.7. Amyloglucisidase-oplossing (14 Units/ml) uit Aspergillus Oryzea
4.1.8. Natriumhydroxyde NaOH
4.1.9. Fosforzuur 85% m/ m, H 3PO 4
4.1.10. Celite 545
4.1.11. Petroleumether, kooktraject 40–60°C

4.2.1. Ethanoloplossing 71% v/ v
Breng in een 1000 ml maatkolf 250 ml water. Vul aan met ethanol (4.1.1.) tot aan de ijkstreep en meng. Koel tot kamertemperatuur en vul wederom aan tot de ijkstreep met ethanol (4.1.1.) en meng.
4.2.2. Bufferoplossing
Los 1,5 g dinatriumwaterstoffosfaat (4.1.3.) en 10 g natriumdiwaterstoffosfaat (4.1.4.) op in een maatkolf van 1 l. in 700 ml water. Vul aan met water tot aan de ijkstreep en meng. Stel indien nodig de pH in op 6.0 door druppelsgewijze toevoeging van hetzij verdunde dinatriumwaterstoffosfaatoplossing hetzij verdunde natriumdiwaterstoffosfaatoplossing.
4.2.3. Natriumhydroxyde oplossing 0,285 mol/l
Los 11,4 Natriumhydroxyde (4.1.8.) in een maatkolf van 1 L op in een 700 ml water. Koel af tot kamertemperatuur, vul aan met water tot aan de ijkstreep en meng.
4.2.4. Fosforzuuroplossing 0,329 mol/l
Los 37,9 fosforzuur 85% m/ m(4.1.9.) in een maatkolf van 1 L op in 700 ml water. Vul aan met water tot aan de ijkstreep en meng.

6.1.1. Indien het vetgehalte van het monster meer dan 5% m/ mbedraagt dient het monster ontvet te worden.
Indien het vetgehalte onbekend is verdient het aanbeveling steeds een vetextractie toe te passen. Weeg tot op 0,01 g nauwkeurig 10 g van het monster af in een bekerglas van 250 ml. Voeg toe 25 ml petroleumether. Roer gedurende 15 minuten, met behulp van een magneetroerder (5.11.). Laat gedurende enkele minuten bezinken en schenk de petroleumetherlaag voorzichtig af.
Herhaal deze procedure twee maal. Plaats het bekerglas gedurende een nacht in de vacuumdroogstoof (5.1.) bij 70°C±1°C. Bepaal het massaverlies.
6.1.2. Maal zonodig het ontvette monster met behulp van de laboratoriummolen (5.2.) tot een poeder met een deeltjesgrootte van 0,3–0,5 mm.

6.2.1. Weeg in tweevoud tot op 0,1 mg nauwkeurig ongeveer 1 g van het analysemonster(6.1.2.) in een bekerglas van 400 ml(hoog model). Voeg aan ieder bekerglas toe 50 ml fosfaatbufferoplossing (4.2.2.). Voeg toe 100 microliter Termanyloplossing (4.1.5.).
Dek de bekerglazen af met aluminiumfolie en plaats gedurende 15 minuten in het kokende waterbad (5.7.). Zwenk iedere 5 minuten om. De temperatuur van de inhoud van de bekerglazen dient ongeveer 100°C te bereiken. Verleng zonodig de incubatietijd (30 minuten is meestal voldoende).
Koel af tot kamertemperatuur en stel de Ph in op 7,5±0,1 door toevoeging van ongeveer 10 ml natriumhydroxyde oplossing 0,285 mol/l (4.2.3.).
6.2.2. Voeg toe 5 mg protease (4.1.6.). Maak daartoe een oplossing met een bekend gehalte en pipetteer de benodigde hoeveelheid.
Dek de bekerglazen af met aluminiumfolie en plaats ze gedurende 30 minuten in het schudwaterbad (5.8.) bij 60°C±1°C.
Koel af tot kamertemperatuur en stel de pH in op 4,5±0,2 met ongeveer 10 ml fosforzuur 0,329 mol/l (4.2.4.).
6.2.3. Voeg toe 0,3 ml amyloglucosidaseoplossing (4.1.7.).
Dek de bekerglazen af met aluminiumfolie en plaats ze gedurende 30 minuten in het schudwaterbad (5.8.) 60°C±1°C.
6.2.4. Neem de bekers uit het waterbad en voeg toe 280 ml ethanol 95% v/v(4.1.1.), voorverwarmd op 60°C±1°C. Laat gedurende 60 minuten bij kamertemperatuur staan voor de vorming van het neerslag.
6.2.5. Breng in de Pyrexfilterkroezen (5.10.) 0,5 celite 545(4.1.10.). Droog de filterkroes met celite in de droogstof (5.4.) tot constant gewicht. Koel af in de exsiccator (5.6.) en weeg tot op 0,1 mg nauwkeurig.
6.2.6. Spreid vervolgens de celite gelijkmatig over de bodem van de filterkroes met behulp van een spuitfles gevuld met ethanol 71% v/ v(4.1.11.). Zuig voorzichtig af. De gelijkmatige celitelaag vormt een afscheiding tussen de af te filtreren vezel en de gesinterde bodem van de filterkroes. Hierdoor kan de inhoud van de kroes gemakkelijk verwijderd worden.
6.2.7. Filtreer, zo nodig onder afzuiging, het reactiemengsel (6.2.4.) door de filterkroes(6.2.6.). Was het residu drie maal met telkens 20 ml ethanol 71% v/ v(4.2.1.), vervolgens twee maal met telkens 10 ml ethanol 95% v/v (4.1.1.) en twee maal met telkens 10 ml aceton (4.1.2.).
6.2.8. Droog de filterkroes met inhoud gedurende een nacht bij 70°C±1°C in de vacuumdroogstof (5.1.) of bij 103°C±2°C in de droogstof (5.4.). Koel af tot kamertemperatuur in de exsiccator (5.6.) en weeg tot op 0,1 mg nauwkeurig.
6.2.9. Bepaal in één van de filterresiduen het gehalte aan eiwit volgens de Kjeldahl methode.
Schraap hiertoe de celite en vezel uit een van de filterkroezen op een stikstofvrij filtreerpapier, vouw dit dicht en breng het zo in de Kjeldahldestructiekolf. Gebruik, indien de aard van het eiwit bekend is, de bijbehorende factor. Is de aard van het eiwit onbekend, gebruik dan de factor 6,25.
6.2.10. Plaats de tweede kroes in de moffeloven (5.5.) en veras bij 525°C±25°C gedurende 5 uren. Koel af in de exsiccator (5.6.) en weeg tot op 0,1 mg nauwkeurig.
6.2.11. Voer een blanco bepaling in tweevoud uit teneinde de bijdrage van de gebruikte chemicaliën aan het resultaat vast te stellen.